Ramond Salazar est le 8ème gouverneur du château qui se trouve près du village de Pueblo. Sa famille avait par le passé mener une guerre contre les Illuminados afin de les priver de leurs terres et leurs privilèges, mais en tant que membre fidèle de cette secte, il a décidé de laver ses ancêtres de leurs fautes. Il a donc libéré les Plagas des profondeurs du château pour les offrir à Lord Saddler pour réaliser son projet.

Jack Krauser est un soldat américain spécialisé dans les techniques de combat au corps à corps. Cependant il etait considéré comme mort depuis un crash d'avion deux ans auparavant. C'est aussi un ancien compagnon de Léon mais désormais il se dresse contre lui. La véritable raison de sa présence semble avoir un rapport avec Wesker à qui il doit remettre un échantillon qui permettrait de relever l'ex-multinationale Umbrella.

Le Garrador est une sorte de gladiateur aveugle qui se repère au bruit. Sans être un ennemi terrifiant, il est à redouter tant ses griffes et sa force sont impressionantes.

Del Lago est le premier véritable boss du jeu, malgré sa stature, ce serpent géant (réveillé par Sadler) n'est pas un monstre trop redoutable...

El Gigante est le premier boss digne de ce nom, géant et très puissant, il est aussi idiot et surtout vulnérable...